ReadyAMP®PCR直接擴(kuò)增技術(shù)在酵母菌中應(yīng)用流程
酵母作為單細(xì)胞真核生物,受限于細(xì)胞壁結(jié)構(gòu),DNA提取非常困難。相較于細(xì)菌,溶菌酶無法工作,只能使用破壁酶。而破壁酶價格非常昂貴。所以目前實(shí)驗(yàn)室工作人員更多使用液氮研磨和玻璃珠研磨法,加速破壁。但是以上幾種處理方法均需要大量培養(yǎng)酵母菌,提取周期變長,實(shí)驗(yàn)操作樂趣下降。
我司開發(fā)的ReadyAMP®快速酵母鑒定試劑盒wan美避開以上難點(diǎn)。只需要準(zhǔn)備真菌培養(yǎng)液或菌斑就可以進(jìn)行PCR擴(kuò)增。該方法最大的特點(diǎn)如下:
1、簡單便捷、一步完成
2、檢測線低至104個/mL酵母菌
3、檢測樣本豐富,例如對數(shù)生長期菌液、菌斑等
4、樣本需求量低,例如菌液1-3μL、菌斑1個
5、酵母菌100%檢出
6、難增殖菌種有效
案例A 四種酵母菌擴(kuò)增2個基因
1、釀酒酵母 2、啤酒酵母 3、假絲酵母 4、畢赤酵母
使用ReadyAMP®酵母菌直接PCR擴(kuò)增試劑盒(貨號Nu-Y0101)直接擴(kuò)增四種酵母對數(shù)生長期增殖液,擴(kuò)增2個不同長度基因,分別為700-900bp(ITS)和2200bp(18S)。
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