NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)在油菜中的操作流程
轉(zhuǎn)基因油菜作為全球種植面積增長(zhǎng)最快的作物廣受科學(xué)家的關(guān)注。而油菜籽擁有豐富的油脂含量,使得油菜成為一種十分重要的油料作物。常見(jiàn)的轉(zhuǎn)基因油菜方向包括品種改良、抗病、抗蟲(chóng)、抗除草劑等,所以轉(zhuǎn)基因指標(biāo)的檢測(cè),分子標(biāo)記育種等手段都需要進(jìn)行基因組DNA檢測(cè)。但是面對(duì)大量待篩選樣本,例如葉片、種子等,就目前實(shí)驗(yàn)室提取基因組DNA的技術(shù)手段,效率太低。無(wú)論是使用CTAB法還是硅膠柱提取法,整個(gè)提取純化過(guò)程耗時(shí)費(fèi)力。從而大大降低了實(shí)驗(yàn)室研究人員的積極性。
從經(jīng)濟(jì)角度考慮,目前應(yīng)用于油菜提取基因組DNA的方法主要為CTAB法或離心柱提取法。例如取材量大、液氮研磨、步驟多、提取時(shí)間長(zhǎng)、使用不易購(gòu)買(mǎi)的有毒有害試劑,反復(fù)離心,且無(wú)法高通量操作。隨著田間出樣量逐年增加,該方法已經(jīng)不能滿足實(shí)驗(yàn)室需求,我司開(kāi)發(fā)的NuSmart®轉(zhuǎn)基因油菜快速PCR試劑盒che底解決以上痛點(diǎn)問(wèn)題。
—對(duì)樣本量要求低、微量(1-4mm葉片)
—操作簡(jiǎn)單快速(5分鐘釋放基因組DNA)
—55℃處理
—不用液氮研磨
—不用離心
—不使用生物酶,例如蛋白酶K
—不使用有毒有害有機(jī)試劑
操作流程
案例A 油菜不同大小葉片擴(kuò)增2個(gè)基因
成熟期葉片直徑1:1mm 2:2mm 3:3mm 4:4mm
使用NuSmart®轉(zhuǎn)基因油菜快速PCR試劑盒(貨號(hào)Nu-GMOR01)處理成熟期葉片,2×GMO Mix擴(kuò)增2個(gè)不同長(zhǎng)度基因,分別為525bp(基因1)和240bp(基因2)。
案例B 油菜不同部位樣品擴(kuò)增2個(gè)基因
1、幼苗期葉片 2、成熟期葉片 3、莖 4、根 5、花蕊 6、種子
使用NuSmart®轉(zhuǎn)基因油菜快速PCR試劑盒(貨號(hào)Nu-GMOR01)處理根、莖、葉、花蕊、種子,2×GMO Mix擴(kuò)增2個(gè)不同長(zhǎng)度基因,分別為525bp(基因1)和240bp(基因2)。
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