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植物樣本不再使用液氮可使用NuSmart^®核酸直接釋放試劑盒

植物樣本的傳統(tǒng)提取DNA或RNA之前都需要對(duì)樣本進(jìn)行液氮研磨破壞細(xì)胞壁，這樣做的好處有以下幾點(diǎn)：

1、植物細(xì)胞具有堅(jiān)固的細(xì)胞壁，特別是纖維素和木質(zhì)素等成分，使用液氮研磨可以有效地破壞這些細(xì)胞結(jié)構(gòu)，使得細(xì)胞內(nèi)DNA/RNA更容易釋放；

2、低溫環(huán)境有助于減少核酸酶的活性，提高核酸的提取質(zhì)量和產(chǎn)量；

3、使樣本均勻破碎，增加提取試劑與核酸的接觸面積，提高核酸提取的效率；

4、對(duì)于長(zhǎng)片段研究時(shí)，更能保持完整性；

看來(lái)液氮研磨是bi不可少的步驟，但是一旦樣本量成百上千，液氮研磨就成為繁瑣的限速步驟，而且液氮的溫度低至-196℃，使用過(guò)程中極易誤傷，對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員安全意識(shí)要求很高?？偨Y(jié)發(fā)現(xiàn)使用液氮有以下幾個(gè)缺點(diǎn)：

1、溫度極低，使用過(guò)程中需要佩戴手套和護(hù)目鏡；

2、起始樣本量大一些，避免研磨過(guò)程中損失；

3、無(wú)法高通量操作；

4、無(wú)法自動(dòng)化操作；

5、操作需謹(jǐn)慎，導(dǎo)致提取DNA時(shí)間延長(zhǎng)數(shù)倍；

那怎么辦呢？NuSmart®核酸直接釋放試劑盒來(lái)助力，試劑盒中PL-DNA Lysis和葉片混合后，55℃反應(yīng)5分鐘，DNA模板就制備好了，操作流程見下圖。整個(gè)操作流程非常簡(jiǎn)單，wan全不用擔(dān)心液氮使用問(wèn)題，也不用擔(dān)心一天的效率太低，提高整個(gè)工作效率。

NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)的優(yōu)勢(shì)是什么?劃重點(diǎn)來(lái)了——

√對(duì)于小量和微量樣本十分友好

√操作簡(jiǎn)單，無(wú)需訓(xùn)練

√基因組完整性好

√無(wú)酶、無(wú)有機(jī)試劑

√無(wú)大型設(shè)備投入

總結(jié)來(lái)說(shuō)，NuSmart^®核酸直接釋放試劑盒中不含有任何有毒、易燃、易爆成分，甚至無(wú)需佩戴手套即可取用。

樣本量低對(duì)于分子生物實(shí)驗(yàn)室科研人員來(lái)說(shuō)一直都是一個(gè)痛點(diǎn)，例如☆法醫(yī)鑒定的拭子含量都是微量

☆待分類細(xì)菌沒有合適的培養(yǎng)基培養(yǎng)，產(chǎn)量很低

☆流式分選后細(xì)胞很少很少

之所以是痛點(diǎn)，主要是因?yàn)榘凑諏?shí)驗(yàn)室常用核酸提取方法只有離心柱提取法或者磁珠提取法，這些方法都需要大量樣本支持。例如30mg組織、10⁶個(gè)細(xì)胞、100mg水稻葉片、1mL血液等等。這些條件成為下游實(shí)驗(yàn)的限速因素。庫(kù)思擇開發(fā)的NuSmart^®核酸直接釋放試劑盒對(duì)微量樣本非常友好，甚至一個(gè)細(xì)胞不在話下。參考下圖，使用NuSmart^®細(xì)胞和組織PCR試劑盒Plus對(duì)一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行處理后，可以有效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)4kb的基因。

使用NuSmart^®細(xì)胞和組織PCR試劑盒Plus（貨號(hào)Nu-C01）處理1個(gè)Sp2/0細(xì)胞，使用2×Master TaqMix(With Dye)擴(kuò)增不同長(zhǎng)度基因（分別0.5kb、1kb、2kb、3kb、4kb）。

總結(jié)來(lái)說(shuō)無(wú)論樣本多少，只要有完整結(jié)構(gòu)、有核酸NuSmart^®試劑盒都能夠解決。

目前可以使用的樣本參考如下：