廣譜型DNA 免核酸提取試劑應(yīng)用
貨號:M-DNA01
試劑盒應(yīng)用
本試劑盒中采用*配方,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,無需反復離心,通過裂解和吸附獲得高質(zhì)量的DNA。該DNA 無需進行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCR、STR 等擴增。DNA Lysis 可用于血樣、唾液、腹水、細胞、組織(例如淋巴結(jié)、脾臟、腎臟、肺、肌肉、脊椎、皮膚、尾巴、耳朵等)、拭子(例如血拭子、咽拭子)、DNA 病毒、大腸桿菌、農(nóng)桿菌、葡萄球菌、環(huán)境樣本(例如擦拭物、水樣本、鞋底)、支原體、衣原體以及植物等樣品中基因組DNA 的提取。
本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。
試劑盒組成
組分M-DNA0101(50T) M-DNA0102(250T)
DNA Lysis 1 mL 5 mL
保存條件 4oC 保存。使用前將DNA Lysis 室溫充分混勻。
需要準備 金屬恒溫浴、離心機
使用方法
一、不同樣品的處理方法
1. 組織液的處理
(1)組織液包括組織研磨液、細胞懸液、血清、血液、唾液、尿液、拭子處理液※等。取10 μL組織液置于離心管中。
※:棉簽放入500μL生理鹽水或無菌水中,浸泡5-10min,用力擠壓后溶液取10 μL置于離心管中。
(2)加入20 μL DNA Lysis。
(3)充分混勻。
(4)置于55oC 加熱5 分鐘。溶液即為DNA 模板。
2. 組織塊的處理
(1)用眼科剪剪取1-2mm 組織塊,并將組織塊剪成肉泥狀。
(2)加入20 μL DNA Lysis。
(3)充分混勻。
(4)置于55oC 加熱5 分鐘。
(5)10000rpm 離心2-3 分鐘,取上清。上清即為DNA 模板。
3. 其他樣本的處理
(1)菌類包括大腸桿菌、農(nóng)桿菌、葡萄球菌等。取20 μL DNA Lysis 放置在離心管中。
(2)用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分,放在(1)中溶液中。如果是培養(yǎng)液,取10μL 放在(1)中溶液中。
(3)充分混勻。
(4)置于55oC 加熱5 分鐘。溶液即為DNA 模板。
4. DNA 病毒的處理
(1)細胞懸液參考“組織液的處理"。
(2)病料組織參考“組織塊的處理"。
5. 植物樣品的處理
(1)參考“組織塊的處理"。
二、推薦PCR 反應(yīng)體系
注意事項
一、試劑盒使用前注意事項
(1)所有試劑應(yīng)按照溫度儲存。請勿反復凍融。
(2)檢測前后均需要對操作區(qū)進行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等。耗材均
需使用商品化的無酶耗材。
(3)DNA Lysis 采用配方,若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬于正?,F(xiàn)象。
二、試劑盒使用過程中注意事項
(1)PCR 過程中推薦使用陰性對照和陽性對照。
(2)整個過程中使用的吸頭、離心管等耗材應(yīng)丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中,防止形成環(huán)境污染。
三、試劑盒使用后注意事項
(1)DNA Lysis 處理后的DNA 模板(除血樣)可在-20℃保存至少1 個月。避免反復凍融,防止基因組斷裂。
(2)PCR 反應(yīng)完成后,嚴禁在實驗區(qū)開蓋,在污染區(qū)進行瓊脂糖電泳,以防止氣溶膠污染。為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。
來源范圍
15021202164
上海市楊浦區(qū)國康路100號2層
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